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RETICULOCITOS

Sinonimia: recuento de reticulocitos.

Método: coloración supravital (azul de metileno, azul brillante de cresilo, nuevo azul de metileno); citometría de flujo: el contador hematológico ADVIA 120 realiza un análisis bidimensional.

Muestra: sangre entera.

Estabilidad: la sangre entera con EDTA es estable a temperatura ambiente hasta 48 hs y a 4ºC hasta 72 hs.

Valores de referencia:

Métodos manuales:

Proporción relativa: niños y adultos: 0.5 -1.5 %

neonatos: 2 – 6 %

Valor absoluto: adultos: 30 - 100.103 /µl

neonatos: 65 - 230.103 /µl

Métodos automatizados: niños y adultos: 0.5 – 2 %

Significado clínico:

Los reticulocitos son células de transición entre los eritroblastos nucleados y los hematíes maduros. Cuando se someten a coloración supravital se observa el ARN durante el proceso de maduración de los precursores de los hematíes en la médula ósea; la reducción del tamaño se asocia con condensación aumentada de la cromatina nuclear y expulsión final del núcleo picnótico. A la vez, la síntesis de hemoglobina (Hb) va aumentando.

Las células rojas no nucleadas permanecen en la médula ósea hasta 4 días pasando por varios estadios de maduración (tipos I a IV). Debido a que la síntesis de Hb no es completa, las coloraciones habituales permiten observar a los reticulocitos como células policromatófilas.

Se puede esquematizar una eritropoyesis normal como sigue:

Expresión de resultados:

Los reticulocitos se expresan como porcentaje relativo de hematíes y/o en valor absoluto.

Se han propuesto varias correcciones para la expresión de los resultados.

El Indice de reticulocitos corregidos (IRC) se determina cuando el recuento de hematíes es muy alto o cuando el número de células rojas maduras está disminuido, realizando la corrección por hematocrito que se requiera.

IRC = recuento de reticulocitos (%) x hematocrito / 45 %

siendo 45 % el valor normal de hematocrito.

El Indice de maduración de reticulocitos (IMR) o Indice de producción reticulocitaria (IPR) es una corrección adicional que considera el estímulo eritrocitario compensador que se produce en caso de anemias intensas. En estos casos el número de reticulocitos en sangre periférica es superior al que corresponde al grado de regeneración eritroblástica, debido a que la anemia provoca un estímulo eritropoyético adicional que facilita una salida precoz de reticulocitos desde la médula a la sangre y un acortamiento de su período de maduración intramedular y un aumento del período de maduración periférica. Este fenómeno conocido como “desviación reticulocitaria” o shift se caracteriza por la presencia de macrocitos policromatófilos. El período de maduración reticulocitario es un factor que se mide en días y está en relación inversa al hematocrito.

Esta corrección consiste en dividir el valor de reticulocitos corregidos por dicho factor dado en días que depende del tiempo de maduración:

Factor = 1.0 si el hematocrito es de 45%

Factor = 1.5 si el hematocrito es de 35%

Factor = 2.0 si el hematocrito es de 25%

Factor = 3.0 si el hematocrito es de 15%

Indice de maduración reticulocitario (IMR) = IRC / factor.

Si el índice es mayor o igual de 3 indica aumento de actividad eritropoyética medular (anemias regenerativa), mientras que un IMR menor de 2 indica escasa actividad eritropoyética.

Indices reticulocitarios:

Los métodos automatizados permiten la determinación de distintos parámetros reticulocitarios. El citómetro de flujo ADVIA 120 mide simultáneamente los índices eritrocitarios y reticulocitarios. Los reticulocitos son teñidos con un colorante de ácidos nucleicos y luego se miden la dispersión y absorción utilizando el canal láser de diodo.

Los parámetros obtenidos son: el volumen reticulocitario (MCVr), la concentración corpuscular media de hemoglobina reticulocitaria (CHCMr) y el contenido de Hb de los reticulocitos (CHr), siendo este último el más importante. (Ver Laboratorio en el estudio hematológico. Anemias).

Contenido de hemoglobina de los reticulocitos (CHr): es una medida directa de la hemoglobina (Hb) presente en los reticulocitos nuevos en sangre periférica. Valores de CHr menores a 26 pg indican una inadecuada disponibilidad de hierro (Fe) para una óptima eritropoyesis.

Las principales aplicaciones clínicas de CHr son las siguientes:

· Identificación temprana de una deficiencia de hierro. La deficiencia de Fe es uno de los déficits nutricionales más comunes y la principal causa de anemia ferropénica en niños y mujeres adultas. Por consiguiente, es esencial el diagnóstico temprano de la deficiencia de Fe para evitar las complicaciones sistémicas de una anemia ferropénica.

El diagnóstico de deficiencia de Fe se basa en los siguientes indicadores bioquímicos: ferremia, transferrina, saturación y ferritina. Actualmente se adicionan: receptores de transferrina sérica circulante y el contenido de hemoglobina reticulocitaria CHr.

El diagnóstico de anemia ferropénica se basa en la presencia de anemia microcítica hipocrómica y eritrocitos con altos niveles de zinc-protoporfirina (ZPP) además de Fe, transferrina y ferritina.

Se demostró que CHr y Hb (no así la ferritina) son los únicos parámetros significativos para predecir la deficiencia de Fe y la anemia ferropénica. Además, con cada incremento unitario en el CHr se reducen en 30% y 45% las probabilidades de deficiencia de Fe y anemia ferropénica respectivamente.

· Evaluación del status de Fe sérico en pacientes hemodializados: un valor de CHr menor de 26 pg es una medida precisa del status de Fe en dializados; un valor de CHr menor al contenido de hemoglobina de los eritrocitos maduros (CH) indica el inicio agudo de deficiencia de Fe; la CHr responde rápidamente (48 horas) al tratamiento con Fe suministrado por vía intravenosa.

· Monitoreo de la terapia con eritropoyetina recombinante humana (rHuEPO) en dializados: este test permite detectar la deficiencia funcional de Fe. Este fenómeno se produce durante la estimulación eritropoyética intensa de terapia con eritropoyetina, en la cual la cantidad de Fe disponible para la eritropoyesis resulta insuficiente, a pesar de tener niveles normales de ferritina y transferrina.

· Detección de deficiencia funcional de Fe en pacientes con enfermedad renal terminal.

· El CHr se utiliza conjuntamente con el porcentaje de células hipocrómicas (%H) para analizar los niveles funcionales de Fe disponibles para eritropoyesis. (Ver Laboratorio en el estudio hematológico. Anemias). Estos valores son más relevantes que la medición de ferritina, cuyos valores pueden estar falsamente aumentados por procesos inflamatorios.

Grado de absorbancia de los reticulocitos: se observa en el histograma de reticulocitos y es una medida de la madurez de los mismos. Los reticulocitos se clasifican en reticulocitos de alta, media o baja absorción. Los reticulocitos de alta absorción, con un alto contenido de ARN son las células más inmaduras.

Volumen medio reticulocitario (MCVr): es un parámetro que aún tiene escasa utilidad clínica porque es poco estable.

Utilidad clínica:

•- Evaluación de la función eritropoyética.

•- Diagnóstico diferencial de anemias no regenerativas y formas hiperregenerativas.

•- Monitoreo de la respuesta a terapias en caso de anemias por deficiencia de Fe, cobre, vitamina B12 y B6.

•- Monitoreo de eritropoyesis después de transplante de médula ósea en el caso de anemia aplásica.

•- Evaluación de deficiencia funcional de Fe con la determinación del índice CHr.

•- Evaluación y clasificación de anemias en base al índice IMR y el recuento de reticulocitos:

Enfermedad Recuento de reticulocitos IMR

Anemia aplásica

Crisis anémica

Anemia no regenerativa

Regeneración de MO

Deficiencia crónica

Deficiencia de Fe

Talasemia

Mielodisplasia

Deficiencia Vit B12

Anemia Hemolítica

Hemorragia -

-

-

-

– / N

– / N

N / +

N / +

-

+

N / + -

- / N

N / +

N / +

N

+

N / +

N / +

N / +

+

+

N: normal

+: aumentado

- : disminuido.

Variables preanalíticas:

Aumentado:

Donación de sangre. Plomo. Alcohol. Ejercicio.

Variables por enfermedad:

Aumentado:

Anemias hemolíticas, anemias posthemorrágicas y anemias carenciales en tratamiento, hepatitis viral, tripanosomiasis, histoplasmosis, enfermedad de Hodgkin, leucemia, policitemia vera, déficit de vitamina C, abetalipoproteinemia, talasemia mayor y menor, enfermedad de HbC, enfermedad de HbH, mielofibrosis, eritroblastosis fetal.

Disminuido:

Aplasia medular. Anemias carenciales (megaloblástica y ferropénica). Anemias diseritropoyéticas (adquiridas y congénitas).

Variables por drogas:

Aumentado:

Allopurinol, aminopirina, antipiréticos, antipirina, arseniales, aspirina, corticotropina, plomo, levodopa, metil-dopa, noproxeno, nitrofuranos, penicilina, procainamida, quinidina, sulfonas.

Disminuido:

Cloramfenicol, clorpropamida, citaralina, datinomicina, metatrexato, rinblastina.

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Recuento dee hematies x valor relativo de reticulocitos % x 100.

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